百香果(Passiflora edulia  Sims)是西番蓮科、西番蓮屬草質(zhì)藤本植物，廣植于熱帶和亞熱帶地區(qū)，在中國栽培于廣西、廣東、福建等地。研究表明百香果含有豐富的藥物成分、維生素、超纖維和蛋白質(zhì)等對人體有益的成分，能鎮(zhèn)靜消炎、增強(qiáng)免疫力等。百香果中除含有百香果螺環(huán)酮苷外，還含有木脂素類、香豆素類、黃酮類、生物堿類、多糖類等的成分，較難實(shí)現(xiàn)百香果螺環(huán)酮苷與其他物質(zhì)的分離，且百香果螺環(huán)酮苷的含量很低，結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)很相似，很難通過簡單的分離方法一次獲得百香果螺環(huán)酮苷的單體。

為了更深入研究百香果的成分，開發(fā)和利用該植物，尋找一種更好的提取率高、成本低和易于工業(yè)化生產(chǎn)百香果螺環(huán)酮苷分離純化工藝，為百香果的活性和應(yīng)用開發(fā)研究奠定基礎(chǔ)。

本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，而提供一種百香果螺環(huán)酮苷單體的分離純化方法及其應(yīng)用。這種方法能有效除去百香果中的大量雜質(zhì)，可一次性獲取百香果螺環(huán)酮苷，為百香果螺環(huán)酮苷類化合物的活性研究和單一成分的新藥開發(fā)提供物質(zhì)基礎(chǔ)。

本發(fā)明目的的技術(shù)方案是：一種百香果螺環(huán)酮苷單體的分離純化方法，包括如下步驟：

1）將百香果去殼得到百香果果瓤的提取物用10?15個質(zhì)量比的50%?75%乙醇水溶液提取，回收提取液的乙醇后，余下的水部分用10倍蒸餾水稀釋，得到百香果果瓤粗提物水溶液；

2）將步驟1）得到的百香果果瓤粗提物水溶液進(jìn)行大孔吸附樹脂柱層析，充分吸附后，用4?6個柱體積蒸餾水沖洗，去除未被吸附的雜質(zhì)，再依次用各4?6個柱體積的0%?20%乙醇水溶液洗脫，棄去洗脫液，然后以4?6體積的10%?30%乙醇水溶液洗脫，濃縮洗脫液，得到富含百香果螺環(huán)酮苷的洗脫部分；

3）用甲醇溶解步驟2）10%?30%乙醇水溶液洗脫部分樣品，然后進(jìn)行硅膠色譜柱層析，依次各用4?6個柱體積的3%?5%的二氯甲烷與97%?95%、5%?10%的二氯甲烷與95%?90%的甲醇混合液作為洗脫劑進(jìn)行洗脫純化，棄去5%的二氯甲烷與95%的甲醇混合液洗脫液，收集5%?10%的二氯甲烷與95%?90%的甲醇混合液洗脫物；

4）將步驟3）中收集的5%?10%的二氯甲烷與95%?90%的甲醇混合液洗脫物進(jìn)行高效液相色譜柱層析純化，獲得百香果螺環(huán)酮苷，所得百香果螺環(huán)酮苷為新化合物。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)如下：

本技術(shù)方案中的百香果螺環(huán)酮苷單體分離純化的方法，針對百香果中存在的各組分的理化性質(zhì)，能有效除去百香果中的大量雜質(zhì)，獲得純度較高的百香果螺環(huán)酮苷單體，可以實(shí)現(xiàn)百香果螺環(huán)酮苷的目標(biāo)制備，可一次性獲取百香果螺環(huán)酮苷，從而可以不斷豐富百香果螺環(huán)酮苷類庫，為百香果螺環(huán)酮苷類化合物的活性研究和單一成分的新藥開發(fā)提供物質(zhì)基礎(chǔ)。

這種方法能有效除去百香果中的大量雜質(zhì)，可一次性獲取百香果螺環(huán)酮苷，為百香果螺環(huán)酮苷類化合物的活性研究和單一成分的新藥開發(fā)提供物質(zhì)基礎(chǔ)。